Los ensayos de los productos químicos para la determinación de sus propiedades se deben realizar de según una serie de métodos y ensayos de laboratorio normalizados y reconocidos internacionalmente. Estos ensayos de laboratorio se deben realizar conforme al Real Decreto 822/1993, de 28 de mayo, sobre buenas prácticas de laboratorio, y al Real Decreto 223/1988, de 14 de marzo, sobre protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos.

El Anexo V del Real Decreto 363/1995, de 10 de marzo, por el que se aprueba el Reglamento sobre notificación de sustancias nuevas y clasificación, envasado y etiquetado de sustancias peligrosas, describe los métodos de ensayo para la determinación de las propiedades físico-químicas, toxicológicas y ecotoxicológicas que permiten establecer las bases de una correcta clasificación de las sustancias y preparados que se fabrican en todo el mundo.

Estos métodos se basan en metodologías reconocidas y recomendadas por organismos internacionales competentes, entre ellos, la OCDE, IUPAC, USEPA, etc. y según normas internacionales, tales como ISO, DIN, ASTM, etc.

Los métodos que existen son los siguientes:

• Parte A. Métodos para la determinación de las propiedades fisico-químicas
• Parte B. Métodos para la determinación de la toxicidad y otros efectos sobre la salud
• Parte C. Métodos para la determinación de la ecotoxicidad

A.1. Punto de fusión/congelación
A.2. Punto de ebullición

A.4. Presión de vapor
A.5. Tensión superficial
A.6. Hidrosolubilidad
A.8. Coeficiente de reparto
A.9. Punto de inflamación
A.10. Inflamabilidad (sólidos)
A.11. Inflamabilidad (gases)
A.12. Inflamabilidad (en contacto con el agua)
A.13. Propiedades pirofóricas de sólidos y líquidos
A.14. Propiedades explosivas
A.15. Temperatura de autoinflamación (líquidos y gases)
A.16. Temperatura de autoinflamación de sólidos
A.17. Propiedades comburentes (sólidos)
A.18. Peso molecular medio en número y distribución de los pesos moleculares de los polímeros
A.19. Contenido de sustancias de bajo peso molecular en los polímeros
A.20. Comportamiento de disolución/extracción

B.1. Toxicidad aguda por vía oral
B.1.bis Toxicidad aguda (oral): método de dosis fija
B.1.ter Toxicidad aguda (oral): método de clase tóxica aguda
B.2. Toxicidad aguda por inhalación
B.3. Toxicidad aguda por vía cutánea
B.4. Toxicidad aguda – irritación de la piel
B.5. Toxicidad aguda – irritación ocular
B.6. Sensibilización de la piel
B.7. Toxicidad por administración continuada (28 días) por vía oral
B.8. Toxicidad por administración continuada (28 días) por inhalación
B.9. Toxicidad por administración continuada (28 días) por vía cutánea
B.10. Mutagénesis (ensayo citogenético in vitro en mamíferos, análisis cromosómico)
B.11. Mutagénesis (ensayo citogenético en vivo en médula ósea de mamíferos, análisis cromosómico)
B.12. Mutagenicidad (ensayo de micronúcleos)
énesis (ensayo de mutación revertida en Excherichia coli)
énesis (ensayo de mutación revertida en Salmonella typhimurium)
ón genética en Saccharomyces cerevisiae
ón mitótica en Saccharomyces cerevisiae
ón génica de células de mamífero in vitro
ón y reparación de ADN: síntesis de ADN no programada en células de mamífero in vitro
in vitrode intercambio de cromátidas hermanas
Drosophila melanogaster
ón de células de mamífero in vitro
B.22. Ensayo de letalidad dominante en roedores
ético en células germinales en mamífero in vivo
B.24. Ensayo de la mancha en ratón
B.25. Translocación hereditaria en ratón
B.26. Toxicidad oral subcrónica: ensayo de 90 días en roedores
B.27. Toxicidad oral subcrónica: ensayo de 90 días en no roedores
B.28. Toxicidad dérmica subcrónica: ensayo de 90 días en roedores
B.29. Toxicidad subcrónica por inhalación: ensayo de 90 días en roedores
B.30. Ensayo de toxicidad crónica
B.31. Estudio de teratogenicidad: roedores y no roedores
B.32. Ensayo de carcinogénesis
B.33. Ensayo combinado de toxicidad crónica y carcinogénesis
B.34. Ensayo de toxicidad para la reproducción en una generación
B.35. Ensayo de toxicidad para la reproducción en dos generaciones
B.36. Toxicocinética
B.37. Neurotoxicidad retardada de sustancias organofosforadas por administración única
B.38. Neurotoxicidad retardada de sustancias organofosforadas. Estudio por administración continuada de 28 días

C.1. Toxicidad aguda en peces
C.2. Toxicidad aguda en Daphnia
C.3. Ensayo de inhibición de algas
C.4. Biodegradación: determinación de la biodegradabilidad "fácil"

C.4-A: Pérdida de carbono orgánico disuelto (COD)
C.4-B: Prueba de detección de la OCDE modificada
óxido de carbono (CO₂)
C.4-D: Respirometría manométrica
C.4-E: Frasco cerrado
C.4-F: MITI (Ministerio de Industria y Comercio Internacional de Japón)

C.5. Degradación: demanda bioquímica de oxígeno
C.6. Degradación: demanda química de oxígeno
C.7. Degradación: degradación abiótica en función del pH
C.8. Biodegradación: prueba Zahn-Wellens
C.9. Biodegradación: ensayo de simulación con lodo activado
C.10. Biodegradación: lodo activado: prueba de inhibición de la respiración
C.11. Biodegradación: prueba LASC modificada
C.12. Toxicidad para gusanos de tierra: ensayo consuelo artificial
C.13. Bioconcentración: ensayo dinámico con peces